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紅細(xì)胞膜包覆葫蘆素B納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體/粉防己堿PLGA納米粒/丹參酮IIA磺酸鈉的制備

2022-05-17 14:42 作者:瑞禧生物小曉  | 我要投稿

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采用熔融乳化-低溫固化法及擠壓法制備RBC-CuB-NLC,對其外觀形態(tài)、粒徑、多分散指數(shù)(PDI)、Zeta電位進(jìn)行表征,并測定其包封率、和體外釋放曲線.以MDA-MB-231和MCF-7細(xì)胞作為模型細(xì)胞,以香豆素6(Cou6)為探針,觀察細(xì)胞對Cou6、Cou6-NLC及RBC-Cou6-NLC的攝取情況.采用CCK-8法考察不同制劑對兩種細(xì)胞的增殖作用,并計(jì)算其半數(shù)抑制濃度(IC50).結(jié)果 CuB-NLC溶液具有淡藍(lán)色乳光,結(jié)構(gòu)為類圓形,RBC-CuB-NLC溶液呈淡粉色,具有核殼結(jié)構(gòu).RBC-CuB-NLC的粒徑為(52.2±1.7)nm,PDI為0.11±0.03,Zeta電位為(-6.8±1.7)mV,包封率為(91.3±0.5)%.RBC-CuB-NLC在48 h內(nèi)的累積釋放量為(59.8±1.1)%.細(xì)胞對RBC-CuB-NLC的攝取量最大且其細(xì)胞抑制率最高,IC50值最小。

制備紅細(xì)胞膜包載粉防己堿PLGA納米粒(RPTNs)制備方法:

采用乳化溶劑揮發(fā)法制備粉防己堿PLGA納米粒(PTNs);單因素考察了PLGA的質(zhì)量濃度,有機(jī)相體積,穩(wěn)定劑濃度;優(yōu)化了紅細(xì)胞膜囊泡(RVs)和RPTNs的制備方法;對納米粒的粒徑,PDI,電位,包封率,形態(tài)和穩(wěn)定性進(jìn)行了表征;透析法考察了PTNs和RPTNs的體外釋放特性;CCK-8法考察了該系統(tǒng)的體外細(xì)胞毒性.結(jié)果最佳制備工藝為:PLGA質(zhì)量濃度20 g·L-1,穩(wěn)定劑質(zhì)量濃度10 g·L-1,油水體積比1:20,RVs的制備采用超聲合并擠壓法;制備的PTNs形狀圓整,粒徑為(147.9±0.25) nm,PDI<0.15,包封率為(84.1±0.41)%,在30 d內(nèi)保持穩(wěn)定;RPTNs具有清晰的殼-核雙層結(jié)構(gòu),粒徑為(164.1±1.65) nm,PDI<0.2,在15 d內(nèi)保持穩(wěn)定;體外釋放實(shí)驗(yàn)顯示PTNs和RPTNs在120 h內(nèi)對粉防止堿(tetrandrine,TET)均有緩釋作用,且RPTNs平均累計(jì)釋放量減少了5.33%;體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)表明在正常細(xì)胞中,RPTNs的IC50值均高于游離TET組和PTNs組,且對293T細(xì)胞的IC50值高于對MCF-7的IC50值。

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