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組培室設(shè)計流程-上海農(nóng)卉組培

2022-08-21 16:52 作者:上海農(nóng)卉組培  | 我要投稿

  要做組培,首先要準(zhǔn)備的是:培養(yǎng)基配置實驗室,無菌接種室,培養(yǎng)室,煉苗室,有條件的還可以設(shè)個準(zhǔn)備室和更衣室,作為從外界到無菌室的過渡以保證接種室及培養(yǎng)室的無菌環(huán)境。

  至于器皿:1、培養(yǎng)基配置要用到;電子天平一個,量筒,微波爐(或是其他的鍋之類的,加熱溶解瓊脂用),一個滅菌鍋(培養(yǎng)基及鑷子等器具滅菌用),冰箱一個(培養(yǎng)基各貯備液及植物激素的儲存用)


  2、無菌接種室:超凈工作臺是必備的,有條件的房間還可再裝一個紫外滅菌燈(沒有也行,超凈工作臺里是有紫外滅菌燈的),酒精燈一個


  3、培養(yǎng)室:照明燈,控溫及控濕設(shè)備

  布局可視情況自由設(shè)計,但注意兩個前提;一是要有利于接種及培養(yǎng)環(huán)境的無菌;二是要有利于室驗各環(huán)節(jié)連接轉(zhuǎn)移的方便


 ?。?)準(zhǔn)備階段


  根據(jù)已成功培養(yǎng)的相近植物資料,結(jié)合實際制訂出切實可行的培養(yǎng)方案。然后根據(jù)實驗方案配制適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)消毒劑以及不同培養(yǎng)階段所需的培養(yǎng)基,并經(jīng)高壓滅菌或過濾除菌后備用。


  (2)外植體選擇與消毒


  選擇合適的部位作為外植體,采回后經(jīng)過適當(dāng)?shù)念A(yù)處理,然后進(jìn)行消毒處理。將消毒后的外植體在無菌條件下切割成一定大小的小塊,或剝離出莖尖,挑出花藥,接種到初代培養(yǎng)基上。

 ?。?)初代培養(yǎng)


  接種后的材料置于培養(yǎng)室或光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng),促使外植體中已分化的細(xì)胞脫分化形成愈傷組織,或頂芽、腋芽直接萌發(fā)形成芽。然后將愈傷組織轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基分化成不同的器官原基或形成胚狀體,最后發(fā)育形成再生植株。


 ?。?)繼代培養(yǎng)


  分化形成的芽、原球莖數(shù)量有限,采用適當(dāng)?shù)睦^代培養(yǎng)基經(jīng)多次切割轉(zhuǎn)接。當(dāng)芽苗繁殖到一定數(shù)量后,再將一部分用于壯苗生根,另一部分保存或繼續(xù)擴(kuò)繁。進(jìn)行脫毒苗培養(yǎng)的需提前進(jìn)行病毒檢測。


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