一、細菌轉化實驗實驗方法原理：

細菌轉化實驗中質(zhì)粒DNA粘附在細菌細胞的表面，并在42°C進行短時熱休克處理，以促進DNA的吸收。然后將其在非選擇性培養(yǎng)基中培養(yǎng)一代。質(zhì)粒上攜帶的抗生素基因表達表達后，不含抗生素的培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中生長。

二、細菌轉換實驗所需材料：
1.渦旋混合器

2.微量移液器采樣器

3.移液器吸頭

4.1.5ml微量離心管架

5.雙面微量離心管架

6.干燥的恒溫氣?。ɑ蚝銣厮。?/p>

7.制冰機

8.恒溫搖床

9.培養(yǎng)皿（固體LB-Amp鋪砌）

10.超凈工作臺

11.酒精燈

12.玻璃涂層棒

13.恒溫培養(yǎng)箱。

14.培養(yǎng)基（不含抗生素）

15.LB培養(yǎng)基（含抗生素）

16.無菌ddH2O

17.IPTG

18.X-gal。
（注）準備：無菌ddH2O，將1.5ml離心管放入鋁制飯盒中（滅菌），將移液器吸頭插入相應的吸頭盒中（滅菌），20％IPTG（M / V），2％X-gal（M / V，含N，N-二甲基甲酰胺）。

三、細菌轉化實驗操作步驟：
（1）預先將恒溫水浴的溫度調(diào)節(jié)至42°C。
（2）從-70°C超低溫冰箱中取一管（100μl）合格細菌，立即用手指加熱使其融化，然后將其插入冰，冰浴中5-10min。
（3）加入5μl連接的質(zhì)粒混合物（DNA含量不超過100ng），輕輕搖動并置于冰上20分鐘。
（4）輕輕搖動后，插入42°C水浴中1-2min進行熱震，然后迅速將其放回冰中并靜置3?5min。
（5）在超干凈的工作臺中，向上述每個試管中加入500μlLB培養(yǎng)基（不含抗生素），輕輕混合，然后將其固定在搖床上的彈簧架上，并在37°C搖動1h。
（6）在超凈工作臺上取上述轉化混合物100-300μl，分別倒入含有合適抗生素的LB平皿中，用酒精燈燃燒的玻璃涂層棒要均勻涂覆（注意：玻璃涂層）熄滅棒上的酒精后，請稍等片刻，待冷卻后再涂抹。
（7）如果載體和宿主細菌適合篩選藍點和白點，則在滴加細菌溶液后，在平板上添加40μl2％X-gal和8μl20％IPTG，并用玻璃棒均勻地覆蓋，酒精燈。 。
（8）標記帶涂層的培養(yǎng)皿，將其置于37°C恒溫培養(yǎng)箱中30-60min，直到表面上的液體滲透到培養(yǎng)基中，然后將其倒置并置于37°C恒溫中保溫箱過夜。
（9）在被細菌污染的臺式機上噴灑70％的乙醇，干燥臺式機，并寫出實驗報告。
（10）觀察平板上生長的菌落克隆，只要可以將菌落彼此分離即可。注意白色斑塊。