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【生化3分鐘】離子交換層析|零廢話+全干貨|生物化學(xué)考研助力

2023-08-05 22:12 作者:Forgotten_Sec  | 我要投稿

離子交換層析(離子交換色譜) [注:層析=色譜]

①目的:分離生物大分子(通常是蛋白質(zhì),其實(shí)氨基酸這種小分子也可以)

②原理:蛋白質(zhì)或氨基酸等電點(diǎn)(pI)不同,即在不同pH下所帶電荷不同。

③計(jì)算蛋白質(zhì)帶電情況的簡(jiǎn)便方法:pI-pH為正帶正電,反之負(fù)電,且絕對(duì)值越大電荷量越大。通過(guò)將pI的"I"抽象成數(shù)字編號(hào)"1"可以記憶pI寫在式子的前面。

④離子柱帶的電荷:陰/陽(yáng)離子柱命名是依據(jù)所吸附的電荷負(fù)/正,因此叫什么柱就可以吸什么離子,自己本身就是相反電性的離子。

⑤上樣和洗脫方法:低鹽上柱,高鹽洗脫。(因?yàn)楹罄m(xù)需要用同種電荷與被提純物競(jìng)爭(zhēng),降低后者親和性)[疏水層析是"高鹽上柱,低鹽洗脫",因?yàn)榈望}使環(huán)境更不疏水,降低親和性]

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