滅活疫苗病毒結構蛋白序列表征
滅活疫苗是一種常見的疫苗類型,它們是通過采集病原微生物(如病毒或細菌),然后通過物理或化學方法使其喪失病原性,即不能再引發(fā)疾病,但仍能激發(fā)免疫反應的疫苗。這些疫苗保留了病原體的表面抗原,但已經(jīng)失去了病原體的活性,這些抗原可以刺激免疫系統(tǒng)產(chǎn)生針對性的免疫反應,從而幫助預防疾病。對于病毒滅活疫苗來說,病毒的結構蛋白是其重要的組成成分。病毒的結構蛋白主要包括病毒的表面蛋白和核殼蛋白。這些蛋白質是病毒生命周期和病毒感染宿主的關鍵因素,也是疫苗引發(fā)免疫反應的主要靶點。這些結構蛋白質的序列,即其氨基酸序列,是確定抗原蛋白功能的基礎,對滅活疫苗類藥物進行病原體結構蛋白的氨基酸序列鑒定,不僅可以確保疫苗的質量和有效性,還有助于理解和預測免疫反應,監(jiān)控病毒變異,以及疫苗的改進和開發(fā)。
常用的蛋白質序列分析方法主要包括質譜法和非質譜法(Edman降解法)兩類。
Edman測序又稱Edman降解法測序,是由埃德曼在上世紀50年代創(chuàng)立的用于測定蛋白質一級結構的方法。Edman測序基本原理是將蛋白多肽的N端氨基酸用化學方法依次斷裂,每次只斷裂一個氨基酸,通過高效液相色譜(HPLC)分析斷裂后氨基酸片段,再將少了一個氨基酸的多肽鏈回收,重復進行以上操作,直到最后鑒定出整條多肽鏈的氨基酸排列順序。
質譜法是目前使用最為廣泛的一種蛋白質序列分析方法,基于質譜的蛋白質序列分析結合對應算法和生物信息學技術,可以實現(xiàn)蛋白的N/C末端序列分析、全序列分析和從頭測序分析,其可用于已知蛋白的表達驗證和未知蛋白的氨基酸序列分析?;谫|譜的蛋白序列分析通過特異性蛋白酶將目標蛋白酶切為肽段,再經(jīng)過MS/MS或LC-MS/MS檢測得到肽段二級質譜圖,解析譜圖獲得肽段的氨基酸序列,最后根據(jù)肽段間的重合互補性完成各肽段的拼接,由此可實現(xiàn)完整蛋白質的序列分析。

生物制品表征蛋白序列分析示意圖
百泰派克生物科技(BTP),采用ISO9001認證質量控制體系管理實驗室,獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質量研究服務。我們可為您提供基于高分辨質譜平臺以及島津公司Edman測序系統(tǒng)的滅活疫苗類藥物蛋白序列表征服務。以質譜為基礎的測序技術可以實現(xiàn)對N端封閉和PEG化蛋白的序列測定,與Edman測序形成互補,可精確測定病原體結構蛋白的N末端、C末端以及全長氨基酸序列,包括翻譯后修飾情況。百泰派克生物科技還可根據(jù)需求提供定制化技術服務,歡迎免費咨詢。
百泰派克生物科技傳統(tǒng)疫苗表征內容
