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給細(xì)胞染色,鬼筆環(huán)肽-iFluor 488偶聯(lián)物樣本實(shí)驗(yàn)方案

2021-08-26 16:07 作者:艾美捷  | 我要投稿

鬼筆環(huán)肽的特性是一個(gè)有用的工具,通過(guò)熒光類似物標(biāo)記鬼筆環(huán)肽并用其染色肌動(dòng)蛋白微絲進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀察,研究F-肌動(dòng)蛋白在細(xì)胞中的分布。鬼筆環(huán)肽的熒光衍生物在活體或固定細(xì)胞中定位肌動(dòng)蛋白絲以及在體外觀察單個(gè)肌動(dòng)蛋白絲方面非常有用。熒光鬼筆環(huán)肽衍生物已被用作高分辨率肌動(dòng)蛋白網(wǎng)絡(luò)研究的重要工具。

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艾美捷?鬼筆環(huán)肽-iFluor 488偶聯(lián)物摘要:

1.在微孔板中制備樣品

2.從板中的樣品中除去液體

3.在iFluor中添加Phalloidin??488共軛溶液(100μL/孔)

4.在室溫下將細(xì)胞染色20至90分鐘

5.清洗細(xì)胞

6.用FITC過(guò)濾器在顯微鏡下檢查試樣

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鬼筆環(huán)肽-iFluor 488偶聯(lián)物樣本實(shí)驗(yàn)方案(給細(xì)胞染色):

1.進(jìn)行甲醛固定。在室溫下,用3.0–4.0%甲醛在PBS中培養(yǎng)細(xì)胞10–30分鐘。

注意:避免使用任何含甲醇的固定劑,因?yàn)榧状荚诠潭ㄟ^(guò)程中會(huì)破壞肌動(dòng)蛋白。推薦的固定劑是不含甲醇的甲醛。

2.在PBS中沖洗固定電池2-3次。

3.可選:將PBS中的0.1%Triton X-100添加到固定電池中3至5分鐘,以增加滲透性。在PBS中沖洗細(xì)胞2-3次。

4.添加100μL/孔(96孔板)的Phalloidin iFluor??488將工作溶液結(jié)合到固定電池中,并在室溫下將電池染色20至90分鐘。

5.用PBS輕輕沖洗細(xì)胞2至3次,以去除多余的phalloidin結(jié)合物,然后在顯微鏡下用FITC過(guò)濾器組進(jìn)行電鍍、密封和成像。


用鬼筆環(huán)肽??iFluor 488結(jié)合物(ATT Bioquest)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色。圖像由麥吉爾的先進(jìn)生物成像設(shè)備(ABIF)在蔡司激光掃描共焦顯微鏡上用63x/1.4NA物鏡獲取。顯示的是19幅圖像的zui大強(qiáng)度投影,Z方向間距為0.2 um。


艾美捷科技是AAT?的中國(guó)代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的鬼筆環(huán)肽-iFluor 488偶聯(lián)物。


給細(xì)胞染色,鬼筆環(huán)肽-iFluor 488偶聯(lián)物樣本實(shí)驗(yàn)方案的評(píng)論 (共 條)

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